产品货号:
JN5032
中文名称:
防污染探针法直扩SuperMix
英文名称:
2×BalbStart Blood Direct Probe qPCR SuperMix(UDG)
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是专用于免除样品的核酸提取纯化步骤,直接进行荧光定量PCR检测(TaqMan或Molecular Beacon等)的专用试剂。本制品使用特殊工艺处理的DNA聚合酶,并结合精心优化的反应Buffer,是一种2×浓度的预混型试剂。本品具有很强的抑制物耐受性,无需进行DNA提取纯化,可用于抗凝全血、血浆、血清、尿液、咽拭子、唾液等样品的DNA直接扩增检测,可扩增全血浓度高达25%。同时,本制品运用了dUTP-UDG防污染系统,在PCR反应过程中加入dUTP形成含有dU碱基的扩增产物,此产物可在下次PCR反应前被体系内的UDG酶消化,从而有效防止PCR产物污染造成的假阳性。并配有不同浓度的ROX Reference Dye,用于不同仪器校正孔间荧光信号误差。
- 高特异性:采用特殊工艺制造的HotStartTaq DNA聚合酶,可以进行热启动法PCR反应,大大提高了PCR扩增的特异性。
- 防污染:dUTP-UDG系统有效防止PCR产物污染造成的假阳性。
- 快捷:PCR反应所必需试剂集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
组分 | 5mL | 25mL |
2×Direct Probe qPCR SuperMix(UDG) | 1mL×5 | 1mL×25 |
RNase-Free Water | 1mL×5 | 1mL×23 |
ROX I | 200μL | 1mL |
ROX II | 200μL | 1mL |
保存:-20℃
请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。
- 常用反应体系
成分 用量 2×Direct Probe qPCR SuperMix(UDG) 10μL 上游引物(10μM) 0.2~1.0μM (终浓度) 下游引物(10μM) 0.2~1.0μM (终浓度) 探针(10μM) 0.4μL 模板 XμL ROX(需根据机器型号选择) 0.4μL RNase-Free Water 至20μL - 推荐扩增程序:
循环数 温度 时间 1 50℃ 2min 1 95℃ 10min 35~45 95℃ 10s 60℃ 30~60s
附录1:根据PCR仪选择使用ROX
- ROX I校准的Real Time PCR仪有:
ABI 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast;
ABI StepOne/StepOnePlus及其他仪器。 - 用ROX II校准的Real Time PCR仪有:
ABI 7500/7500 Fast;ABI ViiA7;ABI Q5 Q6;
ABI Quant Studio 6/7 Flex;Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P及其他仪器。 - 不需要用ROX校准的Real Time PCR仪有:
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/iQ/My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon/Chromo4;
Eppendorf MasterCyclerrealplex/realplex 2s。
Cepheid SmartCycler;Illumina Eco qPCR;
Roche Applied Science LightCycler 480;
Thermo Scientific PikoReal Cycler;
Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/Rotor-Gene 6000及其他仪器。
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